狐仙，美艳又善良的白狐。曾救过宁采臣的祖先宁定光，从而与宁家结缘。三千年后，狐族遭遇灭族之灾，为了报仇，聂小倩放弃成仙，以杀书生宁采臣为目的，却未想宁采臣是宁定光的后代，从此命运开始轮转，两人竟擦出爱的火花，上演一段爱恨纠葛，悲欢离合.....

温文儒雅的书生，宁定光的后代，自幼饱读诗书，文质彬彬，在初次见到聂小倩时便对其一见钟情。两人在接触中互生爱意，并帮助聂小倩辗转查明了当年聂家先人铸剑时是否屠杀狐狸的真相。彼此两情相悦，但无奈人妖殊途，最终还是无法走到一起。

法力高强的猎妖师，是个深明大义，痴情又正直的正派道士。侠义心肠的一开始便对善良的狐妖聂小倩有着点化和救命之恩，身上不仅担当着斩妖除魔、维护正义的使命，更一心希望可以渡化聂小倩归于正道，修炼成仙，却未料在相处之中动了真情，最终甘愿成为她的护花使者，护她一世安危。

魔界妖王，阴险毒辣又野心勃勃的大魔王。曾与宁采臣的祖先武士宁定光为了神剑而大战，最终惨败。不甘失败的他伺机偷袭宁定远并波及狐妖一族，更在之后欺骗狐仙聂小倩。最终真相被聂小倩众人识破，与对方血战，并最后还是被消灭。

捉妖女侠，是追魔人家族的继承者，江湖人称“追魔罗刹女”。虽头衔厉害，但实际性格大大咧咧且爱管闲事，道行更是不够，因此经常闹出笑话。后与燕赤霞一同帮助宁采臣与聂小倩，并渐渐被燕赤霞的法力折服，一心想努力成为一名优秀的追魔者。

竹精，聂小倩青梅竹马的小伙伴，虽身为妖，可没有一丝妖气，反而像树林中的精灵，清风朗月、玉树临风。自小跟聂小倩有婚约，更对她一往情深，处处爱护关怀心上人，更几次救小倩于水火之中，但无奈小倩却在报仇之路上爱上了宁采臣，虽伤透了心，可仍对小倩痴心不改。

聂小倩的妹妹，可爱勇敢的小狐狸。虽同为狐族，并又是小倩的亲生妹妹，可却从不把姐姐放在眼里。因为情窦初开的她一直喜欢着与聂小倩有婚约的树妖陶晋，更因此被爱情冲昏了头，因妒生恨，总是用尽办法拆散陶晋和小倩。

千年树妖，与聂小倩的母亲是死对头。

兔子精，聂小倩的好朋友，妩媚又娇俏的小妖。喜欢宁采臣，并为了得到宁采臣的心而与聂小倩明争暗斗，因为一个男人而好姐妹变成“情敌”。

聂小倩、聂小环的母亲，千年狐妖。